一、 空气净化系统升级（硬件核心）

这是提高洁净等级的物理基础。

1. 安装独立的净化送风系统：

• 最佳方案：为每个关键区域（特别是标本制备区）安装独立的全新风净化空调机组。杜绝空气在各区之间串通。

• 高效过滤器：送风末端必须安装H14级高效空气过滤器，对0.3μm微粒过滤效率≥99.995%。这是达到ISO 5级（百级）或更高洁净度的关键部件。

• 定期更换：制定严格的HEPA过滤器更换、检漏和压差监测计划。

2. 合理的通风与气流组织：

• 单向气流：在超净工作台或生物安全柜内是垂直单向流。对于整个房间，设计上应追求整体层流或定向气流，即空气从最清洁区（试剂准备）流向污染风险最高区（产物分析），避免倒流。

• 增加换气次数：提高房间的换气次数（例如从普通的10-20次/小时提高到20-40次/小时），可以更快地稀释和清除房间内的气溶胶。

二、 压力梯度控制升级（防交叉污染的关键）

压力控制是防止污染扩散的无形屏障。

1. 严格的阶梯压差：

• 理想压力顺序应为：试剂准备区 → 标本制备区 → 扩增区 → 产物分析区。

• 压差值应足够稳定和显著，建议相邻区域之间保持≥10 Pa的压差。例如：试剂准备区（+20 Pa）> 标本制备区（+10 Pa）> 扩增区（-10 Pa）> 产物分析区（-20 Pa）。这样空气永远从清洁区流向污染区。

• 连锁缓冲间：在每个区域的入口设置缓冲间，并确保缓冲间的压力介于相邻两区之间，且门不能同时打开。

2. 实时监控与报警：

• 安装数字式压差计和监控系统，实现实时显示、数据记录和压差异常（如门未关好导致压差丧失）声光报警。

三、 布局与人流物流管理升级（流程核心）

1. 绝对的单向流程：

• 人员：必须严格按照试剂准备 → 标本制备 → 扩增 → 产物分析的顺序前进，严禁逆向折返。

• 物品：同样遵循单向流动。试剂、耗材从前端进入，样本从特定窗口进入标本制备区，扩增后的产物只能向末端移动。废物流向也需专门设计。

• 空气：如前所述，气流方向与人物流一致。

2. 物理隔离的强化：

• 各区之间除传递窗外，墙壁、天花板、地板应完全密封，杜绝任何非可控的空气泄漏通道。

• 传递窗应带互锁和紫外消毒功能，且最好采用双门灭菌传递舱。

四、 内部设备与操作规范升级

1. 关键设备的升级：

• 标本制备区：必须使用Ⅱ级A2型或B2型生物安全柜（B2为全排风，更安全），而不是普通的超净工作台。生物安全柜可以保护人员和样品，并防止气溶胶外溢。

• 就地消毒：增加移动式紫外线消毒车，在每批次实验后对台面和空气进行补充消毒。安装可定时控制的固定紫外灯。

• 专用设备：每个区域（尤其是前三个区）的移液器、离心机、实验服、耗材必须完全专用，严禁跨区移动。

2. 表面与日常管理：

• 建材：墙面、地面、台面应使用光滑、无孔、耐腐蚀、易清洁消毒的材料（如环氧树脂自流坪、彩钢板墙体）。

• 清洁程序：制定严格的清洁消毒SOP，使用能有效降解DNA的消毒剂（如含次氯酸钠或DNA-Zyme的专用清洁剂）。

• 人员培训：最严格的硬件也需要人来执行。必须对实验人员进行深度培训，使其理解污染原理，并严格遵守单向流、分区操作、规范消毒等所有规定。

五、 洁净度等级目标与认证

明确你想要达到的标准：

• 中国标准：参考《GB 50346-2011 生物安全实验室建筑技术规范》和《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》。标本制备区通常建议达到万级洁净度（ISO 7级），局部操作区域（生物安全柜内）达到百级（ISO 5级）。

• 国际标准：参考ISO 14644-1洁净室标准。

• 认证：建设完成后，应聘请第三方权威检测机构进行认证，检测项目包括：

• 悬浮粒子数（洁净度等级）

• 沉降菌/浮游菌

• 压差梯度

• 风速与换气次数

• 气流流型（烟雾测试）

• 温度、湿度、照度、噪声